DPPH-Methode

ZELLSCHÄDEN UND ROS

Zellschäden werden durch reaktive Sauerstoffspezies (ROS) induziert. ROS sind freie Radikale, reaktive Anionen mit Sauerstoffatomen oder sauerstoffhaltige Moleküle, die in der Lage sind, freie Radikale zu erzeugen. Einige Beispiele sind Hydroxylradikal, Superoxid und Wasserstoffperoxid.

Die Hauptquelle von ROS in vivo ist die aerobe Atmung, aber ROS werden auch bei der Beta-Oxidation von Fettsäuren, beim Metabolismus xenobiotischer Verbindungen durch Cytochrom P450, bei der Phagozytose-Stimulation von Pathogenen oder Lipopolysacchariden usw. produziert. ROS und oxidativer Stress im Allgemeinen sind an einigen chronischen Erkrankungen wie Alzheimer- und Parkinson-Krankheit, Krebs und Alterung beteiligt.

DAS SUPEROXID-RADIKAL

Ausgehend von einem O2-Molekül und der Anlagerung eines Elektrons an das äußere Orbital entsteht das Reduktionsprodukt des molekularen Sauerstoffs: das Superoxidanion (O2 .- ). Es wird bei der oxidativen Phosphorylierung, durch Enzyme (z. B. Xanthinoxidase) und Leukozyten gebildet. Aufgrund seiner Toxizität haben alle aeroben Organismen verschiedene Isoformen des Gegenenzyms entwickelt: die Superoxid-Dismutase (SOD). SOD ist ein sehr effizientes Enzym, das in der Lage ist, das Superoxid-Anion mit zwei H+ zu verbinden und die Dismutationsreaktion durch einen metallbasierten Co-Faktor zu katalysieren, wobei H2O2 und O2 als Endprodukte entstehen. Wenn das Superoxid-Anion nicht richtig und rechtzeitig inaktiviert wird, kann es Schäden an Membranen, Lipiden, Proteinen und DNA verursachen.

ENZYMATISCHE INAKTIVIERUNG DES SUPEROXIDS

Unter normalen Bedingungen werden in unserem Körper ROS durch Enzyme wie Superoxiddismutase (SOD), Katalase (CAT) und Glutathionperoxidase (GPx) inaktiviert. SOD ist ein Schlüsselenzym, das in der Lage ist, das Superoxid-Radikal zu inaktivieren, eine der reaktivsten und daher gefährlichsten Radikalarten.

DIE SUPEROXID-DISMUTASE ENZIME

Um die schädlichen Auswirkungen von ROS zu reduzieren, haben Zellen verschiedene Abwehrstrategien entwickelt, darunter enzymatische und nicht-enzymatische Systeme. Betrachtet man die antioxidativen Enzyme, so spielen einige von ihnen eine präventive Rolle, indem sie ROS direkt eliminieren. Unter diesen Enzymen ist die Superoxid-Dismutase die erste Verteidigungslinie, die das Superoxid-Anion entfernt, das erste und reaktivste Radikal, das von molekularem Sauerstoff stammt. SOD ist daher eines der wichtigsten antioxidativen Abwehrsysteme, das in fast allen Zellen, die Sauerstoff ausgesetzt sind, vorhanden ist. Die von SOD katalysierte Reaktion ist eine Dismutation mit einer Kinetik zweiter Ordnung, die auf den folgenden Halbreaktionen basiert:

 

 

DPPH-Methode

Die antiradikale Kapazität wurde mit der DPPH-Methode bewertet. Die Probe wird in eine konzentrierte Lösung eines freien Standardradikals (1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl) gegeben und dessen Konzentration spektrophotometrisch gemessen, um die Fähigkeit des Phytokomplexes, die Radikale zu löschen, zu beurteilen. Superox-D hat eine hohe antiradikale Kapazität aufgrund von Quenching-Mechanismen.

16-mal mehr antiradikalisch im Vergleich zu Melone

37-fache antiradikale Wirkung im Vergleich zu SOD aus Melone

 


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